जीन अभिव्यक्ति को विभिन्न स्तरों पर विनियमित किया जा सकता है। चूंकि, जीन अभिव्यक्ति के परिणामस्वरूप पॉलीपेप्टाइड का निर्माण होता है, इसलिए इसे प्रतिलेखन स्तर से इसके अनुवाद तक कई चरणों में विनियमित किया जा सकता है।
यूकेरियोट्स में, जीन अभिव्यक्ति को विनियमित किया जा सकता है-
(i) ट्रांसक्रिप्शनल स्तर- जब एमआरएनए का प्राथमिक प्रतिलेख बनता है।
(ii) प्रसंस्करण स्तर – जब स्प्लिसिंग होती है (इंट्रोन्स को हटा दिया जाता है)
(iii) नाभिक से साइटोप्लाज्म तक एमआरएनए का परिवहन
(iv) ट्रांसलेशनल स्तर – जब एमआरएनए को पॉलीपेप्टाइड अणु में अनुवादित किया जाता है।
प्रोकैरियोट्स में, आम तौर पर जीन अभिव्यक्ति को ट्रांसक्रिप्शनल दीक्षा में शुरुआत में नियंत्रित किया जाता है। आरएनए पोलीमरेज़ की गतिविधि को सहायक प्रोटीन द्वारा नियंत्रित किया जाता है जो प्रेरित या दमनकारी की तरह कार्य करता है।
ट्रांसक्रिप्शनल विनियमन के लैक ऑपेरॉन मॉडल-
लैक्टोज या लैक ऑपेरॉन की अवधारणा जैकब और मोनाड द्वारा दी गई थी। वे ट्रांसक्रिप्शनल स्तर पर जीन अभिव्यक्ति के विनियमन की व्याख्या करने वाले पहले व्यक्ति थे।
लॉ ऑपेरॉन में 5 विशिष्ट जीन होते हैं- एक नियामक जीन या अवरोधक जीन, ऑपरेटर और 3 संरचनात्मक जीन।
जीवाणु ई कोलाई जब लैक्टोज के साथ एक माध्यम में उगाया जाता है तो 3 एंजाइम पैदा होते हैं।
बीगलेक्टोसिडेस, गैलेक्टोज परमीज और थियोगलेक्टोसिडेस ट्रांसेटाइलेज़। लाख ऑपेरॉन में; दमनकारी अणु के लिए जीन कोड। जेड वाई और ए कोड नामक 3 संरचनात्मक जीन पहले उल्लिखित एंजाइमों को कोड करते हैं। इन 3 जीनों को ऑपरेटर जीन नामक एक एकल जीन द्वारा पुन: व्यवस्थित किया जाता है, जो सिस्ट्रॉन जेड में मौजूद है। ऑपरेटर और संरचनात्मक जीन को सामूहिक रूप से ऑपेरॉन के रूप में जाना जाता है। ऑपरेटर जीन एक स्विच की तरह काम करता है। संरचनात्मक जीन व्यक्त किए जाते हैं या व्यक्त नहीं किए जाते हैं जो इस बात पर निर्भर करता है कि ऑपरेटर जीन चालू या बंद है या नहीं।
अवरोधक जीन ऑपरेटर के कार्य को नियंत्रित करता है। यह लगातार एमआरएनए को रिप्रेसर प्रोटीन का उत्पादन करने के लिए स्थानांतरित करता है। लाख ऑपेरॉन का कामकाज।
(ए) इंड्यूसर रिप्रेसर प्रोटीन की अनुपस्थिति में ऑपरेटर जीन के साथ जुड़ सकता है। बाइंडिंग पर यह ऑपरेटर जीन की गतिविधि को अवरुद्ध करता है जिसका अर्थ है कि स्विच बंद हो जाता है।
3 संरचनात्मक जीन व्यक्त नहीं किए जाते हैं और इसलिए कोई एंजाइम नहीं बनते हैं।
(बी) लैक्टोज रिप्रेसर प्रोटीन जैसे इंड्यूसर की उपस्थिति में ऑपरेटर जीन के साथ बंध नहीं सकता है।
ऑपरेटर जीन सक्रिय रहता है जिसका अर्थ है स्विच चालू है। 3 संरचनात्मक जीन खुद को व्यक्त करते हैं और इसलिए, एंजाइम बनते हैं।
ऑपरेटर जीन सक्रिय रहता है जिसका अर्थ है स्विच चालू है। 3 संरचनात्मक जीन खुद को व्यक्त करते हैं और इसलिए, एंजाइम बनते हैं।
नहीं तो
डीएनए फिंगर प्रिंटिंग की दक्षिणी धब्बा संकरण तकनीक को स्पष्ट कीजिए।
डीएनए फिंगर प्रिंटिंग की साउथर ब्लॉट हाइब्रिडाइजेशन तकनीक के मुख्य चरण हैं:
(i) डीएनए का अलगाव
(ii) प्रवर्धन
(iii) एंडोन्यूक्लिज़ एंजाइम पर प्रतिबंध लगाकर डीएनए का पाचन
(iv) डीएनए का पृथक्करण
(v) अलग किए गए डीएनए टुकड़ों को नाइट्रोसेल्यूलोज झिल्ली या नायलॉन में स्थानांतरित करना या सोखना।
(vi) लेबल किए गए वीएनटीआर जांच का उपयोग करके डीएनए टुकड़ों का संकरण
(vii) संकरित डीएनए अंशों का वर्गीकरण
(viii) डीएनए का पृथक्करण इसमें कोशिका से डीएनए का निष्कर्षण और रासायनिक उपचार और सेंट्रीफ्यूजेशन द्वारा इसका शुद्धिकरण शामिल है।
(vii) वीएनटीआर प्रोब लेबल का उपयोग करके संकरण – दक्षिणी सोख्ता के बाद, डीएनए टुकड़ों को संकरण द्वारा रेडियोधर्मी आइसोटोप के साथ टैग किया जाता है, ताकि एक्स-रे फिल्म द्वारा उनकी स्थिति का पता लगाया जा सके। यह नायलॉन झिल्ली को ‘प्रोब्स’ युक्त स्नान में डालकर किया जाता है। जांच एकल फंसे हुए पूरक डीएनए के छोटे टुकड़े हैं, जिन्हें रेडियोधर्मिता के साथ टैग किया गया है जो बेस पेयरिंग नियम के अनुसार डीएनए वीएनटीआर अनुक्रमों की विशिष्ट श्रृंखला से जुड़ते हैं।
(viii) संकरित डीएनए अंशों का पता लगाना-
ऑटो-रेडियोग्राफ प्राप्त करने के लिए झिल्ली को एक्स-रे फिल्म के संपर्क में लाया जाता है। जब विकसित किया जाता है, तो यह प्रकाश और अंधेरे बैंड का एक अनूठा पैटर्न प्रकट करता है। पैटर्न दर्जनों समानांतर बैंड के रूप में है जो डीएनए की संरचना को दर्शाता है।