पुनः संयोजक डीएनए प्रौद्योगिकी के कार्यों को पूरा करने के लिए पांच प्रमुख उपकरणों का नाम बताइए। प्रत्येक उपकरण के कार्य का उल्लेख करें।

उत्तर: जीई या आर-डीएनए तकनीक की प्रक्रिया में कई चरण शामिल थे और पूरी प्रक्रिया को कई एंजाइमों और अन्य एजेंटों के उपयोग से संभव बनाया गया है जिन्हें सामूहिक रूप से जैविक उपकरण कहा जाता है। इनका उपयोग आनुवंशिक सामग्री के हेरफेर को पूरा करने के लिए किया जाता है। इनमें से, पुनः संयोजक डीएनए प्रौद्योगिकी और उनके संबंधित कार्यों को पूरा करने के लिए पांच प्रमुख उपकरण हैं-

(i)प्रतिबंध एंडोन्यूक्लिज़- जीई या आर-डीएनए तकनीक की प्रक्रिया इन एंजाइमों की खोज से संभव हो जाती है। इन एंजाइमों में विशेषता है कि वे डीएनए में विशिष्ट न्यूक्लियोटाइड अनुक्रमों को पहचान सकते हैं और लक्ष्य साइटों नामक विशिष्ट प्रतिबंध साइटों पर या उसके पास डीएनए डबल हेलिक्स को छोड़ सकते हैं। प्रतिबंध एंजाइमों का उपयोग न केवल डीएनए के अनुक्रम विश्लेषण के लिए किया गया है, बल्कि क्लोनिंग और डीएनए को बढ़ाने के लिए भी किया गया है। तीन प्रकार के प्रतिबंध एंडोन्यूक्लिज़ हैं- टाइप-I, टाइप-II, और टाइप-III जिनमें से टाइप-II का उपयोग ज्यादातर आर-डीएनए तकनीक के लिए किया जाता है।

(ii) न्यूक्लियस- ये एंजाइम एक विशेष बंधन के टूटने को उत्प्रेरित करते हैं जिससे न्यूक्लिक एसिड का विखंडन होता है। वे एक्सोन्यूक्लियस हो सकते हैं (जो 3 या 5 ‘अंत में अपने टर्मिनल न्यूक्लियोटाइड पर न्यूक्लिक एसिड पर हमला करते हैं) या एंडोन्यूक्लिज़ (जो एक एकल न्यूक्लियोटाइड श्रृंखला को टुकड़ों में काट सकते हैं, या किसी भी बिंदु पर डीएनए डुप्लेक्स को छोड़ सकते हैं लेकिन एक छोर पर नहीं)।

(iii) डीएनए लिगेस- ये एंजाइम हैं जो दो किस्में या न्यूक्लिक एसिड के टुकड़ों के सिरों को एक साथ जोड़ते हैं।

क्लोनिंग वैक्टर- ये आणविक वाहन या वाहक हैं जो एक सेल में नए डीएनए को पेश करने के लिए आवश्यक हैं। वे डीएनए अणुओं को ले जाते हैं जो इसमें डाले गए आर-डीएनए टुकड़े बनाते हैं। जीई के लिए व्यापक रूप से उपयोग किए जाने वाले वैक्टर में शामिल हैं- प्लास्मिड (बैक्टीरियल साइटोप्लाज्म में स्वतंत्र रूप से तैरते हुए डीएसडीएनए के आत्म-प्रतिकृति अतिरिक्त क्रोमोसोमल रिंग), बैक्टीरियोफेज (विशेष रूप से लैम्ब्डा फेज), कॉस्मिड्स (लैम्ब्डा बैक्टीरियोफेज के एक सामंजस्यपूर्ण अंत अनुक्रम वाले प्लास्मिड, जिसे वायरस कण में लैम्ब्डा डीएनए की कुशल पैकेजिंग के लिए आवश्यक ‘लागत साइट’ कहा जाता है, जिसका उपयोग ज्यादातर यूकेरियोटिक डीएनए के लंबे खंडों की क्लोनिंग के लिए किया जाता है), फैस्मिड्स (फेज डीएनए के टुकड़े के साथ प्लास्मिड), ई कोलाई, और खमीर वैक्टर (सैकरोमाइसेस सेरेविसिया)।